兔血清總補(bǔ)體elisa試劑盒操作步驟

　　兔血清總補(bǔ)體ELISA試劑盒是常用于研究免疫系統(tǒng)的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù)，它是一種準(zhǔn)確、可靠、靈敏的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，在臨床和科研領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。
 
　　一、原理
 
　　ELISA是一種基于抗原-抗體反應(yīng)的檢測(cè)技術(shù)，其中酶標(biāo)記的二級(jí)抗體或親和素與分子之間形成復(fù)合物，通過(guò)底物酶反應(yīng)生成熒光或吸光度信號(hào)。兔血清總補(bǔ)體ELISA試劑盒利用雙抗原夾心法檢測(cè)血清樣品中總補(bǔ)體含量。具體來(lái)說(shuō)，首先將血清樣品加入含有植物血凝素的96孔板孔中固定；然后加入生物素標(biāo)記的補(bǔ)體C3抗體，與未被固定的補(bǔ)體C3結(jié)合；最后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的蛋白A，與生物素結(jié)合的抗體形成復(fù)合體。洗滌后加入底物TMB，產(chǎn)生藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物，加入停止劑停止反應(yīng)，測(cè)定OD值，OD值與樣品中總補(bǔ)體含量呈正相關(guān)關(guān)系。
 
　　二、操作步驟
 
　　1、取出所需試劑和材料，標(biāo)記試板。
 
　　2、加入樣品和對(duì)照物質(zhì)。
 
　　3、加入生物素補(bǔ)體C3抗體(第一抗體)。
 
　　4、洗滌板子去除所有未結(jié)合的第一抗體。
 
　　5、加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的蛋白A(第二抗體)。
 
　　6、洗滌板子去除所有未結(jié)合的第二抗體。
 
　　7、加入底物TMB。
 
　　8、停止反應(yīng)，并測(cè)定吸光度值。
 
　　三、兔血清總補(bǔ)體ELISA試劑盒具有以下優(yōu)點(diǎn)：
 
　　1、靈敏度高，可以檢測(cè)到極低濃度的總補(bǔ)體。
 
　　2、準(zhǔn)確性高，結(jié)果穩(wěn)定可靠。
 
　　3、操作簡(jiǎn)單，易于實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。
 
　　四、應(yīng)用領(lǐng)域
 
　　兔血清總補(bǔ)體ELISA試劑盒廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)和免疫學(xué)等領(lǐng)域。其中，最常見(jiàn)的應(yīng)用是檢測(cè)患者血清中總補(bǔ)體含量，以診斷某些自身免疫性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和其他結(jié)締組織病等。此外，該試劑盒還可以用于研究小鼠模型中的免疫反應(yīng)，評(píng)估藥物對(duì)免疫系統(tǒng)的影響等方面。